首页 > 产品学术 > 学术论文    学术论文
龙血竭中龙血素A与龙血素B在大鼠体内的组织分布研究
作者:孙晓博,金描真,李雪,金鸽
;【关键词】; 龙血竭;龙血素A;龙血素B;高效液相色谱法;组织分布
  Abstract:Objective To study the tissue distribution of loureirin A and loureirin B in rats.Methods After intragastric (i.g.) administration of loureirin A and loureirin B at doses of 250 mg/100 g in rats, the tissue concentrations at different time points were determined by HPLC.Results After i.g. administration, the main tissue distributions of loureirin A and loureirin B in rats were similar. The loureirin A and loureirin B concentrations in the liver and kidney were the highest and those in the spleen,heart,lung,brain, and muscle decreased sequentially.Conclusion There was an extensive distribution of loureirin A and loureirin B in rats.
  Key words:Dracaena cochinchinensis (Lour) S.C.Chen; loureirin A;loureirin B; HPLC;tissue distribution;
  血竭(Dragon′s blood) 又名麒麟竭,为传统名贵中药。国产血竭称龙血竭, 龙血竭具有活血、化瘀、止血、补血的功效,被誉为“活血圣药” [1],临床应用广泛。 文献报道龙血竭中的主要成分为黄酮类化合物,其在治疗冠心病、脑梗死、心肌缺血、脑缺血损伤的保护作等方面有显著疗效[2,3]。龙血素A、龙血素B是龙血竭黄酮的主要成分,所以本文用HPLC法[4]测定了龙血素A和龙血素B在不同组织中的浓度,为临床应用提供理论依据。
  1; 材料与方法
  1.1; 动物
;;; SD大鼠,体质量(250±20) g,雌雄兼备,由中山大学医学院动物中心提供,合格证号:2006A064。
  1.2; 主要仪器及试剂
;;; Waters高效液相色谱仪:515 HPLC泵,2487双波长吸收检测器,N2000双通道色谱工作站(浙江大学智能信息工程研究所);TDL802B台式离心机(上海安亭科学仪器厂);超声仪(上海超声波仪器厂);ZH2; BLENDER涡旋混合器(天津药典标准仪器厂)。
;;;;;;;;
  广西产龙血竭(广西中医学院易胜博ysb248网址厂提供);龙血素A、龙血素B对照品(中国药品生物制品检定所提供);乙腈(色谱纯);甲醇(色谱纯),乙酸乙酯,无水乙醇,冰醋酸等均为分析纯。
  1.3; 色谱条件
;;; 色谱柱:DIAMonSIL; C18(5 μm,250 mm×4.6 mm);保护柱:Easyguard C18 Replacement CartridgesCat#6101;流动相:乙腈1%冰醋酸(体积比35∶65);检测波长:280 nm;流速:1.2 mL/min,柱温30 ℃。
  1.4; 龙血素A、龙血素B对照品贮备液的制备
;;;   
  取龙血素A用甲醇配制成每1 mL含100 μg的溶液,作为对照品储备液。龙血素B用甲醇配制成每1 mL含80 μg的溶液,作为对照品储备液。
  1.5; 样品的制备与测定
;;;   
  取大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑,用水洗净,滤纸吸干,称重,加生理盐水制成30%的组织匀浆液,-20 ℃保存,备用。
;;;   
  取组织匀浆液1 mL,加入乙腈2 mL,乙酸乙酯2 mL[4],涡旋振荡1 min,3 000 r/min 离心10 min,取上清液,再重复提取2次,合并上清液,50 ℃水浴挥干,于残渣中加入100 μL甲醇,溶解,10 000 r/min 离心10 min,取上清液20 μL进样。
 2; 结; 果

  2.1; 标准曲线和线性范围
;;;   
  取各组织空白匀浆液,精密加入龙血素A、龙血素B对照品储备液,配成系列标准溶液,混匀,按“1.5”项下的方法,自“加入乙腈2 mL,乙酸乙酯2 mL”起,依法操作。记录峰面积。以质量浓度(ρ)为横坐标,峰面积(A)为纵坐标进行线性回归,绘制标准曲线,结果表明,龙血素A、龙血素B的质量浓度与峰面积呈良好线性关系,龙血素A和龙血素B的检测限为0.025 μg/mL和0.023 μg/mL,各组织回归方程见表1、表2。表1; 各组织中龙血素A的标准曲线、相关系数及线性范围(略)表2; 各组织中龙血素B的标准曲线、相关系数及线性范围(略)

  2.2; 回收率试验
;;;   
  取各组织空白匀浆液,精密加入龙血素A、龙血素B对照品储备液,混匀,按“1.5”项下的方法,自“加入乙腈2 mL,乙酸乙酯2 mL”起,依法操作。计算绝对回收率,结果见表3、表4。表3; 各组织中龙血素A的回收率试验(略)表4; 各组织中龙血素B的回收率试验(略)

  2.3; 精密度试验
;;;   
  取各组织空白匀浆液,精密加入龙血素A、龙血素B对照品储备液(加入量与回收率项下加入量相同),混匀。按“1.5”项下的方法,自“加入乙腈2 mL,乙酸乙酯2 mL”起,依法操作。计算日内、日间精密度,各组织中龙血素A和龙血素B的日内及日间RSD均小于10%。

  2.4; 稳定性试验
;;;   
  取各组织空白匀浆液,精密加入龙血素A、龙血素B对照品储备液(加入量与回收率项下加入量相同),混匀。放置-20 ℃保存1周,37 ℃水浴解冻后,按“1.5”项下的方法,自“加入乙腈2 mL,乙酸乙酯2 mL”起,依法操作。冻融样品稳定。

  2.5; 方法专属性
;;;   
  取2只大鼠,实验前禁食12 h,自由饮水,1只做空白对照,1只按100 g给予龙血竭250 mg,灌胃给药,给药2 h后处死,按“1.5”项下的方法,依法操作。由图1可见组织中的内源性物质不干扰龙血素A和龙血素B的测定。其他组织的HPLC图中龙血素A和龙血素B的出峰时间与肝脏的HPLC图相同。

  2.5; 组织分布
;;;;;;;
  取大鼠36只(实验前禁食12 h,自由饮水)随机分成6组,每个时间点6只,称重,按100 g大鼠给予龙血竭250 mg,灌胃给药,分别于1、2、3、4、6、10 h处死大鼠,按“1.5”项下的方法,依法操作。结果表明,龙血素A、B在肝脏及肾脏浓度最高,然后依次是肺、脾、心、骨骼肌、脑,见图2、图3。
;
  3; 讨; 论
;;;   
  药物的组织分布与药物本身的理化性质,药物与组织的亲和力及各组织器官的血流量等有密切的关系,因而在组织中的分布不相同。大鼠口服龙血竭后,经血液循环而不同程度地分布于心、肝、脾、肺、肾、脑等组织中,在外周组织分布较少,这与文献[2,3]报道龙血竭中的主要成分为黄酮类化合物,其在治疗冠心病、脑梗死、心肌缺血、脑缺血损伤的保护作等方面有显著疗效相吻合。

 

 

上一篇:中药重楼的研究进展

下一篇:龙血竭加甲硝唑治疗宫颈糜烂临床疗效分析


云南易胜博ysb248网址易胜博ysb248网址有限公司注册地址:云南省昭通市昭阳区工业园区(火车站连接线)      联系电话:0870-2851633      传真:0870-2851633
对外营销驻昆机构地址:云南省昆明市高新区鑫园小区别墅15A幢1-3层                       联系电话:0871-63648999    传真:0871-63633499
Copyright © 云南易胜博ysb248网址易胜博ysb248网址有限公司. www.ynyzt.com All Rights Reserved.